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培养基营养丰富,非常适合作物生长,它的种 [复制链接]

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现在越来越多的人开始使用组织培养育苗技术,如今已经得到广泛应用。关于组织培养育苗技术种类众多,今天就来具体了解它的种类和配制。还不太熟悉的朋友们,一起来学习一下吧!

1.培养基的组成和pH

培养基是决定植物组织培养成败的关键因素之一。常见的培养基主要有两种,分别是固体培养基和液体培养基,二者的区别在于是否加入了凝固剂。

(1)水分 

作为生命活动的物质基础存在。培养基的绝大部分物质为水分。实验研究中常用的水为蒸馏水,而最理想的水应该为纯水,即二次蒸馏的水。生产上,为了降低成本,我们可以用高质量的自来水或软水来代替。

(2)无机盐类 

植物在培养基中可以吸收的大量元素和微量元素都是来自于培养基中的无机盐。培养基中提供的无机盐主要有硝酸铵、硝酸钾、硫酸铵、氯化钙、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠等,不同的培养基配方当中其含量各不相同。

(3)有机营养成分

包括糖类物质,主要用于提供碳源和能源,常见的有蔗糖、葡萄糖、麦芽糖、果糖;维生素类物质,主要用于植物组织的生长和分化,常用的维生素有盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、生物素等;氨基酸类物质,常见的有甘氨酸、丝氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺等,有助于外植体的生长以及不定芽、不定胚的分化促进。

(4)植物生长调节物质 

植物生长调节物质在培养基中的用量很小,但是其作用很大。它不仅可以促进植物组织的脱分化和形成愈伤组织,还可以诱导不定芽、不定胚的形成。最常用的有生长素和细胞分裂素,有时也会用到赤霉素和脱落酸。

(5)天然有机添加物质 

香蕉汁、椰子汁、土豆泥等天然有机添加物质,有时会有良好的效果。但是这些物质的重复性差,还会因高压灭菌而变性,从而失去效果。

(6)凝固剂 

要进行固体培养,要在培养基中加入凝固剂。常见的有琼脂和卡拉胶,用量一般在7~10克/升之间。前者生产中常用,后者透明度高,但价格贵。

(7)其他添加物 

有时为了减少外植体的褐变,需要向培养基中加入一些防褐变物质,如活性炭、维生素C等。还可以添加一些抗生素物质,以此来抑制杂菌的生长。

(8)pH 

培养基的pH也是影响植物组织培养成败的因素之一。pH的高低应根据所培养的植物种类来确定,pH过高或过低,培养基会变硬或变软。生产上或实验中,常用氢氧化钠或盐酸进行调节。

2.培养基的种类

培养基有许多种类,根据不同的植物和培养部位及不同的培养目的需选用不同的培养基。目前国际上流行的培养基有几十种,常用的培养基及特点如下。

(1)MS培养基 

特点是无机盐和离子浓度较高,为较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适,可满足植物的营养和生理需要。它的硝酸盐含量较其他培养基为高,广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养,效果良好。有些培养基是由它演变而来的。

(2)White培养基 

特点是无机盐数量较低,适于生根培养。

(3)B5培养基

特点是含有较低的铵,这可能对不少培养物的生长有抑制作用。从实践得知有些植物在B5培养基上生长更适宜。

(4)N6培养基 

特点是成分较简单,硝酸钾和硫酸铵含量高。在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养和其他组织培养。

加入培养基的营养成分一般需先配制成母液备用,现在有配好的各种培养基干粉。一般现成的培养基干粉中加了营养成分和琼脂,也有没加琼脂的,根据需要购买。

3.培养基的配制步骤

一般来讲,任何一种培养基的配制步骤都是大致相同的。配1升MS培养基的具体操作如下。

①取一大烧杯或铝锅,放入约毫升的水,然后加入MS培养基干粉40毫克(具体用量根据培养基瓶上说明),并不断搅拌,使其溶解。

②将加热溶解好的培养基溶液倒入带刻度的大烧杯中,加入培养所需的植物生长调节物质,定容到1升。

③用1摩尔/升的氢氧化钠溶液(或稀盐酸)调整pH。

④分装到培养容器中(培养瓶)。

⑤高压蒸汽灭菌锅灭菌20分钟(温度为℃,压力为千帕),出锅晾凉备用。

看完了上面的内容,培养基的种类和配制你了解了吗?希望今天小编分享给大家的内容,对各位正在种植蔬菜的朋友,能有所帮助。

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